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人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-9960 人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒
試劑盒組成
預包被微孔板:96孔板,預包被抗CD14單克隆抗體(可拆卸式設計)
標準品:凍干重組CD14蛋白(濃度梯度:9.375-600ng/mL,需用標準品稀釋液復溶)
檢測抗體:生物素標記抗CD14多克隆抗體(100×濃縮液,需稀釋后使用)
酶結合物:HRP標記鏈霉親和素(100×濃縮液)
配套試劑:
TMB顯色液(A/B液分裝)
終止液(2M LS)
洗滌緩沖液(30×濃縮,需稀釋)
樣本稀釋液(含1% BSA的PBS緩沖液)
樣本處理要求
血清/血漿:EDTA抗凝,3000rpm離心10分鐘,避免溶血;建議稀釋倍數1:10-1:50
細胞上清:離心去除顆粒物,直接檢測或-20℃分裝保存(避免反復凍融)
組織勻漿:按1:9加入PBS(pH7.4)勻漿,離心取上清
實驗步驟
標準品梯度稀釋:用樣本稀釋液配制6個濃度梯度(最高濃度600ng/mL,9.375ng/mL)
加樣孵育:
每孔加入100μL標準品/樣本,37℃避光孵育90分鐘
棄液后每孔加350μL洗滌緩沖液,重復洗滌5次
顯色檢測:
加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘
洗滌后加入100μL酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘
加入TMB顯色15分鐘,終止液終止反應,450nm測OD值
數據分析
標準曲線:以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,四參數擬合法繪制曲線
靈敏度:檢測限3.3ng/mL,線性范圍9.375-600ng/mL
注意事項
試劑盒保存:未開封時標準品-20℃保存,其他組分4℃或-20℃分裝(TMB顯色液需4℃避光)
避免使用含NaN3的樣本,HRP活性會被yizhi
實驗建議:同一批次完成檢測,不同數據不可直接比較
注:以上資料僅供參考,如需產品具體資料請咨詢技術老師或品牌供應商。
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